第016章 完美的PCR實(shí)驗(yàn)
吳妍知道,,周文肯定有特殊的提取手法,。
不過見他不愿意說,,她也沒有強(qiáng)求,,畢竟這是別人的看家本領(lǐng),,泄露出去有害無益。
隨后兩個(gè)人又談了一下待遇問題,,吳妍把之前對(duì)石磊說的話,,跟周文又講了一遍,最后笑問道:“你還有什么問題嗎,?”
周文想到了任務(wù),,說:“能不能問一下,我算是合同工還是正式工???”
“這個(gè)嘛……”吳妍遲疑了一下,她沒想到周文會(huì)問這個(gè)問題,。
現(xiàn)在生物生什么情況,,她相信周文心里應(yīng)該很清楚,江州市第一人民醫(yī)院的合同,,而且還那么優(yōu)厚,,別說他一個(gè)小小的本科生了,即使生物碩士生,、博士生,,很多人也是求之不得呢。
他居然還想一步登天,,直接解決編制問題,,真的有些過分了,她自己到現(xiàn)在還是合同工呢,。
吳妍想了想說:“一般來說,,如果是院里聘用的話,那肯定是正式工,,但你這是檢測(cè)中心PCR組的聘用合同,,所以恐怕只能是合同工了,。”
“合同工啊……”周文遲疑著,。
其實(shí)合同工還是正式工,,他真得無所謂,只要能讓他到檢測(cè)中心去實(shí)習(xí)實(shí)踐,,就算臨時(shí)工他也愿意,。
這不是任務(wù)要求在一個(gè)禮拜內(nèi)成為正式工嘛,他不能不抻著點(diǎn),。
1000點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)值和1000點(diǎn)積分呢,,還有一次開黑鐵箱子的機(jī)會(huì)。
吳妍原本以為事情已經(jīng)辦妥了呢,,沒想到這里又節(jié)外生枝了,,于是苦口婆心說:“你雖然是合同工,但是待遇是按照正式工來算的,,并沒有差在哪里,。
另外嘛,什么事都是一步步來的,,你先上班,,編制問題等過一段時(shí)間再解決也不遲嘛?!?p> 周文笑問道:“你是我學(xué)姐,,而且也在醫(yī)院上了一年班了,你說實(shí)話,,我如果真簽了合同工,,編制大概什么時(shí)候能解決?”
“這個(gè)嘛……”吳妍有些尷尬,,端起咖啡杯掩飾了一下,。
等放下杯子后,吳妍說:“那這樣吧,,我?guī)湍慊厝枂?。但說實(shí)話,你不要抱太大期望,?!?p> 周文點(diǎn)點(diǎn)頭,笑道:“行,,那就麻煩學(xué)姐了,。”
“不客氣?!?p> 周文那邊還在離心呢,也沒有多待,,客氣了幾句便起身離開了,。
……
回到實(shí)驗(yàn)室時(shí),楊宇東和顧紅云迫不及待的問他面試成功沒有,?
周文笑呵呵的說:“我提了個(gè)條件,,她說要回去跟領(lǐng)導(dǎo)商量商量,等商量之后再給我準(zhǔn)信,?!?p> 楊宇東無語道:“條件都那么優(yōu)越了,你還要提條件???”
周文說:“我這不是看機(jī)會(huì)難得嘛,就想試試他們的底價(jià),?!?p> 楊宇東:“……”
他真想用提取槍把周文腦漿抽出來一點(diǎn),看他腦子里一天到晚到底在想些什么,?
周文嘿嘿笑著去做PCR實(shí)驗(yàn)了,。
PCR全稱是Polymerase Chain Reaction。
中文名是“聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”,,又稱“聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”,,是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。
能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段,,于幾小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍,。
其原理基本與人體細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制像似,但反應(yīng)體系相對(duì)簡(jiǎn)單,。
當(dāng)然了,,這不意味著PCR簡(jiǎn)單。
相反,,PCR是非常難的.
首先通過高溫“變性”,,把一段雙鏈結(jié)構(gòu)的DNA解鏈,變成兩條單鏈結(jié)構(gòu)DNA,。
之后“退火”,,在低溫下讓“引物”和作為模板的DNA互補(bǔ)結(jié)合,形成局部雙鏈,。
最后中火“延伸”,,通過DNA聚合酶催化以引物為起始點(diǎn)的DNA鏈產(chǎn)生延伸反應(yīng),變成兩條雙鏈結(jié)構(gòu)的DNA,。
接下來不斷重復(fù)這個(gè)過程,。
1變2,,2變4,4變8,,8變16,,16變32……
通過PCR技術(shù),可以從一根毛發(fā),、一滴血,、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定。
比如親子鑒定,;
比如疫苗研究,;
比如病毒疾病防治;
又或者遺傳病研究等等,,都需要大量用到PCR,。
當(dāng)然,周文今天做的水稻蚜蟲生化試劑實(shí)驗(yàn),,其實(shí)是沒有必要做PCR的,。
蚜蟲是一種很低級(jí)的蟲子,一般直接用藥物作用在其身上,,然后看它的遺傳特性就行了,。
之所以還要做PCR,更多的目的也是為了學(xué)習(xí)PCR,。
PCR反應(yīng)體系包含了水,、緩沖液、DNTP(脫氧核糖核苷三磷酸),、引物P1/P2/DNA模板以及TAQ酶,。
等一切都準(zhǔn)備好之后,周文調(diào)節(jié)好提取槍的量程,,然后提取30μl的水到三組PCR管里,。
吸液的時(shí)候嚴(yán)格按照操作規(guī)程,垂直吸液,、慢吸慢放,。
換過槍頭后,提取了5毫升的緩沖液到PCR管中,。
再分別向管中加入DNTP/P1/P2/DNA模板……
得益于這段時(shí)間的學(xué)習(xí),,除了一開始有些緊張外,周文做起來有條不紊,。
等所需原料添加完畢后,,接下來就是離心了。
按照要求設(shè)定好轉(zhuǎn)速后,等了三分鐘,,離心完成,。
周文從離心機(jī)里取出裝著混合液的PCR管,立刻放到了PCR儀上,,進(jìn)行擴(kuò)增,。
設(shè)定94℃預(yù)變性4min。
然后設(shè)定20次循環(huán)擴(kuò)增階段,。
高溫、低溫,、中溫,、高溫……
1變2,2變4,,4變8,,8變16,16變32……
周文焦急的等待著,,心情就像產(chǎn)房外的丈夫一樣,,心里默默祈禱著“母子平安”,同時(shí)也在想,,不知道等會(huì)生出來的是男是女,?身體健康與否?
就在這時(shí),,周文突然想到系統(tǒng)積分可以加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)度,,與其在這里傻等幾個(gè)小時(shí),要不加快看看,?
反正這里也沒有人看到,。
想到這里,周文立刻召喚出個(gè)人屬性頁面,,點(diǎn)擊積分后,,眼前彈出一個(gè)選項(xiàng)。
【請(qǐng)問是否消耗積分加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)度,?是/否】
【是】,。
【本次實(shí)驗(yàn)加快需要消耗20點(diǎn)積分,請(qǐng)?jiān)俅未_認(rèn)】
周文見僅僅只要20點(diǎn)積分就能加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)度了,,那還有什么好猶豫的,,立刻選擇了確認(rèn)。
還不等周文反應(yīng)過來,,下一秒,,PCR儀已經(jīng)完成了擴(kuò)增。
周文心里驚訝不已,系統(tǒng)的力量簡(jiǎn)直神秘莫測(cè),。
在心里感慨了一句,,很快他又緊張了起來。
第一次做PCR,,不知道能不能成功呢,?
周文打開PCR儀,從里面取出PCR管,。
本來下面是產(chǎn)物分析,,不過周文有真視之眼,微微瞇起眼睛,,很快他便看到了高密度的雙螺旋結(jié)構(gòu)的DNA,。
“perfect~”
要不是戴著口罩,周文就要哈哈大笑了起來,。
學(xué)生物的有一個(gè)算一個(gè),,誰不是經(jīng)過無數(shù)次失敗后才學(xué)會(huì)做PCR的,有哪個(gè)人能像他一樣,,第一次做擴(kuò)增,,就一次性成功?
而且擴(kuò)增效果出乎意料的好,,簡(jiǎn)直完美,。
……
江州市,第一人民醫(yī)院,,檢測(cè)中心,,PCR組。
吳妍在外面吃過午飯才回到醫(yī)院,,然后第一時(shí)間就到組長(zhǎng)辦公室匯報(bào)情況,。
“人呢?”正在寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告的張曙光,,頭也不抬的問到,。
吳妍有些不好意思的說:“那個(gè)……還沒來?!?p> 去的時(shí)候她可是拍著胸脯保證說,,手到擒來的,結(jié)果牛皮吹炸了,。
張曙光抬頭意外道:“怎么,,不愿意來?”
吳妍搖搖頭說:“不是,,只是他說……”
吳妍把周文的要求跟張曙光講了一遍,。
張曙光拿筆的左手,,在辦公桌上敲擊著,面帶微笑的說:“你說你,,這么聰明的一個(gè)人,,怎么關(guān)鍵時(shí)候掉鏈子啊,?”
吳妍奇怪道:“我怎么掉鏈子啦,?他要正式工待遇,這個(gè)我哪敢越俎代庖,,替您答應(yīng)?。俊?p> 張曙光笑道:“越俎代庖怎么啦,,他一個(gè)生物本科生,,敢獅子大開口跟你要事業(yè)編制,難道你就不想想憑什么嗎,?”
“憑什么啊,?”吳妍疑惑了一句,,很快便反應(yīng)過來,驚訝道:“噢~~~你是說……”
張曙光呵呵笑道:“你都上門去找人家了,,只要不是太離譜的,,你就先答應(yīng)他嘛,有什么問題回頭再講,??陬^允諾,又不是打包票的,,對(duì)不對(duì),?”
“嗯嗯嗯~老大,我知道錯(cuò)了,?!眳清B連點(diǎn)頭,承認(rèn)錯(cuò)誤,,“那我現(xiàn)在打電話給他,?”
張曙光好笑的搖搖頭,“回都回來了,,急什么啊,,還怕他跑了不成。好歹咱們也是江州一院,,不能太讓人小瞧了,,先抻他兩天再說,。”